Saat menangani mikroorganisme, penting untuk menggunakan teknik aseptik dengan benar - baik untuk mencegah mikroorganisme Anda terkontaminasi oleh kekuatan luar, maupun untuk melindungi diri Anda dan orang-orang di sekitar Anda.
Langkah
Langkah 1. Lindungi diri Anda
Ikat rambut panjang, dan kenakan jas lab dan kacamata pelindung.
Langkah 2. Cuci tangan dan ruang kerja Anda
Cuci tangan Anda menggunakan air dan sabun, dan semprotkan ke bangku dengan etanol 70%.
Langkah 3. Letakkan semua peralatan Anda
Pastikan Anda sudah menyiapkan segalanya sebelum memulai.
Langkah 4. Nyalakan pembakar bunsen setinggi mungkin
Anda akan membutuhkannya untuk mensterilkan peralatan Anda, dan aliran udara ke atas mencegah kontaminan luar mendarat di kultur Anda.
Putar kerah sehingga aliran udara terbuka sepenuhnya
Langkah 5. Sterilkan loop inokulasi
Pegang pada sudut kira-kira 45° ke bawah dan perlahan-lahan gerakkan melalui api sehingga bersinar merah-putih panas.
- Paling mudah untuk menahan lingkaran di antara ibu jari dan jari telunjuk Anda, dan menopangnya dengan jari tengah Anda.
- Bagian terpanas dari nyala api tepat di ujung kerucut api biru bagian dalam.
Langkah 6. Gunakan tangan Anda yang lain untuk mengambil budaya asli Anda
- Jika itu adalah piring, pegang dan buka tutupnya cukup untuk memasukkan loop ke dalamnya.
- Jika itu adalah tabung dengan tutup, gunakan jari kelingking tangan yang Anda pegang loop inokulasi untuk melepas tutupnya, lalu dengan cepat seret bukaan tabung melalui nyala api pembakar bunsen dua kali. Ini disebut menyala dan membunuh apa pun yang ingin masuk ke dalam tabung, dan menciptakan arus konveksi yang memaksa udara keluar dari tabung sehingga tidak ada yang bisa mendapatkannya. Terus pegang tutupnya dengan kelingking Anda untuk langkah berikutnya.
Langkah 7. Inokulasi
Sentuh loop inokulasi ke koloni yang ingin Anda ambil. Jika Anda menginokulasi dari kaldu cair, celupkan loop inokulasi ke dalam tabung dan kocok loop untuk memastikan Anda mendapatkan cukup bakteri.
Langkah 8. Tutup budaya asli
Jika itu piring, tutup saja tutupnya dan letakkan kembali. Jika berbentuk tabung, tarik bukaan melalui api pembakar bunsen dua kali, lalu pasang kembali tutupnya.
Langkah 9. Buka pelat baru
Seperti sebelumnya, gunakan tangan Anda yang bebas untuk membuka tutupnya cukup lebar untuk memasukkan lingkarannya
Langkah 10. Lemparkan bakteri
Usap perlahan loop inokulasi di atas permukaan, berhati-hatilah agar tidak menembus agar.
Pola goresan yang umum adalah metode kuadran
Langkah 11. Tutup piring
Langkah 12. Sterilkan loop inokulasi
Seperti sebelumnya, pegang dengan sudut 45° ke bawah dan gerakkan perlahan melalui nyala api sehingga menjadi merah-putih panas.
Tips
- Secara umum, sarung tangan tidak diperlukan. Semua langkah di atas berfungsi untuk melindungi diri Anda dan bakteri Anda, sehingga risiko kontaminasi sangat rendah. Sarung tangan dapat menyebabkan luka bakar yang parah jika Anda secara tidak sengaja menyentuhnya dengan loop inokulasi panas.
- Ingatlah bahwa Anda bekerja dengan api. Ini bukan masalah besar, pastikan Anda tahu apa yang harus dilakukan jika Anda membakar diri sendiri; hentikan percobaan, bilas luka bakar dengan air dan, jika perlu, beri tahu supervisor Anda.
- Jika Anda melakukan beberapa putaran karena harus menggunakan teknik aseptik, tidak perlu mematikan pembakar bunsen sepenuhnya di antara proses - cukup turunkan ke api pilot dan matikan sepenuhnya saat Anda benar-benar selesai.
